2015版藥典：液相色譜在藥用輔料檢測(cè)方面＂大有可為＂

　　□ 王華鋒

　　作為現(xiàn)代藥品檢驗(yàn)重要的檢測(cè)手段，液相色譜技術(shù)在藥用輔料檢驗(yàn)中也發(fā)揮著重要作用。從《中國(guó)藥典》的修訂中可以看出，隨著我國(guó)藥用輔料品種迅速增加及藥用輔料的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)逐漸完善，結(jié)果精準(zhǔn)、操作簡(jiǎn)便的液相色譜法得到廣泛應(yīng)用和發(fā)展。

　　通常藥用輔料被認(rèn)為是生理惰性、化學(xué)惰性，但諸多藥物不良事件與藥用輔料有關(guān)。湖南藥用輔料檢驗(yàn)檢測(cè)中心主任藥師劉雁鳴介紹說(shuō)，目前，人們尤其關(guān)注藥用輔料的安全、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高，而更嚴(yán)格科學(xué)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)離不開(kāi)先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)，特別是針對(duì)有關(guān)物質(zhì)檢查。有關(guān)物質(zhì)因含量微小，需選擇一些靈敏度高、專(zhuān)屬性強(qiáng)的檢測(cè)方法，如液相和質(zhì)譜連用(HPLC/MS)等現(xiàn)代分析技術(shù)對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。2005年版《中國(guó)藥典》二部收載輔料品種72個(gè)，其中阿司帕坦、聚甲丙烯酸銨酯Ⅰ、聚甲丙烯酸銨酯Ⅱ均應(yīng)用液相色譜法測(cè)定有關(guān)物質(zhì);β-環(huán)糊精應(yīng)用液相色譜法測(cè)定含量。2010年版《中國(guó)藥典》二部輔料收載品種132個(gè)，其中新增品種DL-蘋(píng)果酸、富馬酸、明膠空心膠囊、大豆磷脂、蛋黃卵磷脂等均應(yīng)用液相色譜法檢查有關(guān)物質(zhì);膽固醇、麥芽糖等新增品種均應(yīng)用液相色譜法測(cè)定含量。

　　紫外檢測(cè)器(UVD)用于檢測(cè)具有特定吸收波長(zhǎng)，并在該波長(zhǎng)下響應(yīng)值與濃度成正比的物質(zhì)。大部分藥用輔料如醇類(lèi)、酮類(lèi)、酯類(lèi)、酚類(lèi)等都具有紫外吸收性質(zhì)，因此用紫外檢測(cè)器的高效液相色譜(HPLC-UV)法在藥用輔料檢測(cè)中應(yīng)用最為廣泛。劉雁鳴指出，苯甲醇是注射劑中常用的抑菌劑，但過(guò)量苯甲醇可對(duì)人體產(chǎn)生毒副作用，如靜脈注射刺激性、鞘內(nèi)注射神經(jīng)毒性、過(guò)敏反應(yīng)等不良反應(yīng)。有專(zhuān)家建議用紫外檢測(cè)器的高效液相色譜法測(cè)定野木瓜注射液中苯甲醇的含量，此種方法測(cè)得苯甲醇在線(xiàn)性范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，且操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，為芳香醇類(lèi)輔料應(yīng)用此法檢測(cè)提供了參考。另外，檸檬黃、莧菜紅等是常用的人工合成色素，主要用作膠囊殼和糖衣的著色劑。原來(lái)的標(biāo)準(zhǔn)采用三氯化鈦滴定法測(cè)定含量，操作繁瑣費(fèi)時(shí)，測(cè)定結(jié)果誤差較大。有報(bào)道用紫外檢測(cè)器測(cè)定藥用輔料檸檬黃，測(cè)得結(jié)果線(xiàn)性范圍寬，樣品處理簡(jiǎn)單，試驗(yàn)方法靈敏度高、專(zhuān)屬性強(qiáng)，試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，提高了檢驗(yàn)效率?？捎糜谒幱幂o料色素的含量測(cè)定，為含芳香結(jié)構(gòu)的色素輔料測(cè)定提供了參考。

　　在談到藥用輔料檢測(cè)中的其他高效液相色譜檢測(cè)方法時(shí)，劉雁鳴指出，高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC/ICP-MS)作為微量元素的測(cè)定最有效的途徑之一，高效液相色譜高分離度與電感耦合等離子體質(zhì)譜低檢測(cè)性、寬動(dòng)態(tài)線(xiàn)性范圍及能同時(shí)測(cè)定多種元素、跟蹤元素的變化等特點(diǎn)融合，目前已廣泛的用于食品、環(huán)境、體內(nèi)外藥物分析中微量元素的測(cè)定。該方法應(yīng)用于藥用輔料中微量元素砷、汞、鉻等檢測(cè)的探索性研究項(xiàng)目已在試驗(yàn)室開(kāi)展，目前雖罕見(jiàn)相關(guān)報(bào)道，隨著技術(shù)的成熟與儀器的發(fā)展，其在藥用輔料檢測(cè)中有著廣泛的應(yīng)用前景。同時(shí)，高效液相色譜-核磁共振聯(lián)用技術(shù)(HPLC-NMR)因儀器昂貴，核磁共振靈敏度相對(duì)較低，液相色譜需使用氘代溶劑，溶劑信號(hào)易對(duì)樣品產(chǎn)生干擾等，使其在藥物分析中廣泛應(yīng)用存在一定障礙，但核磁共振在結(jié)構(gòu)分析方面有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，能夠提供最豐富的結(jié)構(gòu)信息，彌補(bǔ)高效液相色譜通用檢測(cè)器只能得到非常有限的結(jié)構(gòu)信息的不足，在實(shí)際藥用輔料雜質(zhì)分析中已進(jìn)入使用階段。

　　高效液相色譜與不同檢測(cè)器的聯(lián)用，可以應(yīng)用于不同種類(lèi)的藥用輔料分析，并且各具優(yōu)勢(shì)。劉雁鳴認(rèn)為，高效液相色譜法在藥用輔料分析中正逐步取代某些原有的繁瑣的化學(xué)反應(yīng)測(cè)定、不精確的比色測(cè)定等，在藥用輔料分析中發(fā)揮著越來(lái)越重大的作用。同時(shí)隨著藥典與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中藥用輔料種類(lèi)的增多，輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高與檢測(cè)制度的完善，新型色譜、光譜、質(zhì)譜、核磁共振的方法以及各種聯(lián)用技術(shù)的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用是未來(lái)的必然趨勢(shì)。